產品描述

　　本品為蘭科植物金釵石斛Dendrobium nobile Lindl.、霍山石斛Dendrobium huoshanense C.Z.Tang et S.J.Cheng、鼓槌石斛Dendrobium chrysotoxum Lindl.或流蘇石斛Dendrobium fimbriatum Hook.的栽培品及其同屬植物近似種的新鮮或干燥莖。全年均可采收，鮮用者除去根和泥沙；干用者采收后，除去雜質，用開水略燙或烘軟，再邊搓邊烘曬，至葉鞘搓凈，干燥。霍山石斛11月至翌年3月采收，除去葉、根須及泥沙等雜質，洗凈，鮮用，或加熱除去葉鞘制成干條；或邊加熱邊扭成螺旋狀或彈簧狀，干燥，稱霍山石斛楓斗。
　　【性狀】鮮石斛 呈圓柱形或扁圓柱形，長約30cm，直徑0.4～1.2cm。表面黃綠色，光滑或有縱紋，節明顯，色較深，節上有膜質葉鞘。肉質多汁，易折斷。氣微，味微苦而回甜，嚼之有黏性。
　　金釵石斛 呈扁圓柱形，長20～40cm，直徑0.4～0.6cm，節間長2.5～3cm。表面金黃色或黃中帶綠色，有深縱溝。質硬而脆，斷面較平坦而疏松。氣微，味苦。
　　霍山石斛 干條呈直條狀或不規則彎曲形，長2～8cm，直徑1～4mm。表面淡黃綠色至黃綠色，偶有黃褐色斑塊，有細縱紋，節明顯，節上有的可見殘留的灰白色膜質葉鞘；一端可見莖基部殘留的短須根或須根痕，另一端為莖尖，較細。質硬而脆，易折斷，斷面平坦，灰黃色至灰綠色，略角質狀。氣微，味淡，嚼之有黏性。鮮品稍肥大。肉質，易折斷，斷面淡黃綠色至深綠色。氣微，味淡，嚼之有黏性且少有渣。楓斗呈螺旋形或彈簧狀，通常為2～5個旋紋，莖拉直后性狀同干條。
　　鼓槌石斛 呈粗紡錘形，中部直徑1～3cm，具3～7節。表面光滑，金黃色，有明顯凸起的棱。質輕而松脆，斷面海綿狀。氣微，味淡，嚼之有黏性。
　　流蘇石斛等 呈長圓柱形，長20～150cm，直徑0.4～1.2cm，節明顯，節間長2～6cm。表面黃色至暗黃色，有深縱槽。質疏松，斷面平坦或呈纖維性。味淡或微苦，嚼之有黏性。
　　【鑒別】（1）本品橫切面：金釵石斛  表皮細胞1列，扁平，外被鮮黃色角質層。基本組織細胞大小較懸殊，有壁孔，散在多數外韌型維管束，排成7～8圈。維管束外側纖維束新月形或半圓形，其外側薄壁細胞有的含類圓形硅質塊，木質部有1～3個導管直徑較大。含草酸鈣針晶細胞多見于維管束旁。
　　霍山石斛 表皮細胞1列，扁平，外壁及側壁稍增厚，微木化，外被黃色或橘黃色角質層，有的外層可見無色的薄壁細胞組成的葉鞘層。基本薄壁組織細胞多角形，大小相似，其間散在9～47個維管束，近維管束處薄壁細胞較小，維管束為有限外韌型，維管束鞘纖維群呈單帽狀，偶成雙帽狀，纖維1～2列，外側纖維直徑通常小于內側纖維，有的外側小型薄壁細胞中含有硅質塊。草酸鈣針晶束多見于近表皮處薄壁細胞或近表皮處維管束旁的薄壁細胞中。
　　鼓槌石斛 表皮細胞扁平，外壁及側壁增厚，胞腔狹長形；角質層淡黃色。基本組織細胞大小差異較顯著。多數外韌型維管束略排成10～12圈。木質部導管大小近似。有的可見含草酸鈣針晶束細胞。
　　流蘇石斛等 表皮細胞扁圓形或類方形，壁增厚或不增厚。基本組織細胞大小相近或有差異，散列多數外韌型維管束，略排成數圈。維管束外側纖維束新月形或呈帽狀，其外緣小細胞有的含硅質塊；內側纖維束無或有，有的內外側纖維束連接成鞘。有的薄壁細胞中含草酸鈣針晶束和淀粉粒。
　　粉末灰綠色或灰黃色。角質層碎片黃色；表皮細胞表面觀呈長多角形或類多角形，垂周壁連珠狀增厚。束鞘纖維成束或離散，長梭形或細長，壁較厚，紋孔稀少，周圍具排成縱行的含硅質塊的小細胞。木纖維細長，末端尖或鈍圓，壁稍厚。網紋導管、梯紋導管或具緣紋孔導管直徑12～50μm。草酸鈣針晶成束或散在。
　　（2）金釵石斛 取本品（鮮品干燥后粉碎）粉末1g，加甲醇10ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取石斛堿對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗，吸取供試品溶液20μl、對照品溶液5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）-丙酮（7:3）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
　　霍山石斛 取本品（鮮品干燥后粉碎）粉末（過二號篩）1g，加無水甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液回收溶劑至干，殘渣加水15ml使溶解，用石油醚（60～90℃）洗滌2次，每次20ml，棄去石油醚液，水液用乙酸乙酯洗滌2次，每次20ml，棄去乙酸乙酯液，用水飽和正丁醇振搖提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，回收溶劑至干，殘渣加無水甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取霍山石斛對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。再取夏佛塔苷對照品適量，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗，吸取上述三種溶液各3～5μl，分別點于同一聚酰胺薄膜上，以乙醇-丁酮-乙酰丙酮-水（4:4:1:17）為展開劑，20℃以下展開，取出，晾干，在105℃烘干，取出，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，在105℃加熱約3分鐘，取出，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
　　鼓槌石斛 取鼓槌石斛〔含量測定〕項下的續濾液25ml，回收溶劑至干，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為供試品溶液。另取毛蘭素對照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗，吸取供試品溶液5～10μl、對照品溶液5μl，分別點于同一高效硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（3:2）為展開劑，展開，展距8cm，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
　　流蘇石斛等 取本品（鮮品干燥后粉碎）粉末0.5g，加甲醇25ml，超聲處理45分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為供試品溶液。另取石斛酚對照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（通則0502）試驗，吸取上述供試品溶液5～10μl、對照品溶液5μl，分別點于同一高效硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（3:2）為展開劑，展開，展距8cm，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
　　（3）霍山石斛 聚合酶鏈式反應-限制性內切酶長度多態性方法。
　　模板DNA提取 取本品0.1g（鮮品干燥），加液氮適量研磨，過五號篩。取粉末25mg，置1.5ml離心管中，加入CTAB沉淀液［2%十六烷基三甲基溴化銨，100mmol/L Tris-鹽酸pH=8.0，10mmol/L乙二胺四乙酸二鈉］1000μl，渦旋震蕩，65℃水浴加熱20分鐘（中間震蕩混勻3次），離心（轉速為每分鐘12000轉）10分鐘，棄去上清液；再加入CTAB沉淀液1000μl，渦旋震蕩，65℃水浴加熱10分鐘，離心（轉速為每分鐘12000轉）10分鐘，棄去上清液；再同法操作一次；棄去上清液，加入CTAB提取液［2%十六烷基三甲基溴化銨，100mmol/L Tris-鹽酸pH=8.0，20mmol/L乙二胺四乙酸二鈉，2.5mol/L氯化鈉］900μl、蛋白酶K（20mg/ml）5μl充分混勻，65℃水浴加熱30分鐘，離心（轉速為每分鐘12000轉）10分鐘，吸取上清液置另一2.0ml離心管中；加入900μl三氯甲烷-異戊醇（體積比24：1）溶液，充分混勻，離心（轉速為每分鐘12000轉）10分鐘；取上清液，加入等體積三氯甲烷-異戊醇（體積比24：1）溶液（約800μl），充分混勻，離心（轉速為每分鐘12000轉）10分鐘；取上清液置另一2.0ml離心管中，加入2/3體積的異丙醇，置-20℃放置30分鐘；離心（轉速為每分鐘12000轉）10分鐘，棄去上清液；沉淀加70%乙醇500μl震蕩1分鐘，離心（轉速為每分鐘12000轉）3分鐘；棄去上清液，沉淀再用70%乙醇500μl震蕩1分鐘，離心（轉速為每分鐘12000轉）3分鐘；棄去上清液，置37℃水浴中揮干溶劑；加入高壓滅菌超純水50μl，溶解，作為供試品溶液，置4℃冰箱中備用。另取霍山石斛對照藥材0.1g，同法制成對照藥材模板DNA溶液。
　　PCR-RFLP反應 鑒別引物：5'-ATTCTTCATCAAGTTTAGTGCATTC-3'和5'-AGAGCTGATGGGCCTTTGA-3'。PCR反應體系：在200μl離心管中進行，反應總體積為25μl，反應體系包括10×PCR緩沖液2.5μl，dNTP（10mmol/L）1μl，鑒別引物（10μmol/L）各0.2μl，Taq DNA聚合酶（5U/μl）0.2μl，10mg/ml牛血清蛋白1μl，25%聚乙烯吡咯烷酮1μl，模板1μl，無菌超純水18.4μl。將離心管置PCR儀，PCR反應參數：95℃預變性5分鐘，循環反應40次（95℃ 10秒，56℃ 20秒，72℃ 20秒），72℃延伸5分鐘。取PCR反應液，置200μl離心管中，進行酶切反應，反應總體積為20μl，反應體系包括10×酶切緩沖液2μl，PCR反應液17.5μl，AluⅠ內切酶（10U/μl）0.5μl，酶切反應在37℃水浴反應30分鐘。另取無菌超純水，同法上述PCR-RFLP反應操作，作為空白對照。
　　電泳檢測 照瓊脂糖凝膠電泳法（通則0541），膠濃度為2.5%，膠中加入核酸凝膠染色劑GelRed；以DL500作為DNA分子量標記，供試品與對照藥材PCR產物和酶切反應產物的上樣量分別各8μl，DNA分子量標記上樣量為2μl（0.5μg/μl）。電泳結束后，取凝膠片在凝膠成像儀上或紫外透射儀上檢視。霍山石斛供試品凝膠電泳圖譜中，在與對照藥材凝膠電泳圖譜相應位置上，在100～200bp間應有單一DNA條帶，且PCR產物與酶切產物條帶位置一致。空白對照無條帶。
　　【特征圖譜】霍山石斛 照高效液相色譜法（通則0512測定）。
　　色譜條件與系統適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-甲醇溶液（1:1）為流動相A，0.01mol/L乙酸銨溶液為流動相B，按下表中的規定進行梯度洗脫；流速為每分鐘0.8ml；柱溫40℃；檢測波長為340nm。理論板數按夏佛塔苷峰計算應不低于5000。
　　　　參照物溶液的制備 取霍山石斛對照藥材約1g，加入甲醇50ml，超聲處理30分鐘（功率250W，頻率50kHz），取出，放冷，濾過，濾液濃縮至5ml，作為對照藥材參照物溶液。另取夏佛塔苷對照品加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，作為對照品參照物溶液，即得。
　　供試品溶液的制備 取本品（鮮品干燥后粉碎）粉末（過三號篩）約1g，同對照藥材參照物溶液制備方法，制成供試品溶液，即得。
　　測定法 分別精密吸取上述參照物溶液與供試品溶液各5～20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，即得。
　　供試品色譜中應呈現5個特征峰，并應與對照藥材參照物色譜峰中的5個特征峰保留時間相對應，其中峰1應與對照品參照物峰保留時間相對應。
　　　　【檢查】水分 干石斛不得過12.0%（通則0832第二法）。
　　總灰分 干石斛 不得過5.0%（通則2302）。
　　霍山石斛 不得過7.0%（通則2302）。
　　【浸出物】霍山石斛 照醇溶性浸出物測定法（通則2201）項下的熱浸法測定，用乙醇作溶劑，干品不得少于8.0%。
　　【含量測定】金釵石斛 照氣相色譜法（通則0521）測定。
　　色譜條件與系統適用性試驗 DB-1毛細管柱（100%二甲基聚硅氧烷為固定相）（柱長為30m，內徑為0.25mm，膜厚度為0.25μm），程序升溫：初始溫度為80℃，以每分鐘10℃的速率升溫至250℃，保持5分鐘；進樣口溫度為250℃，檢測器溫度為250℃。理論板數按石斛堿峰計算應不低于10000。
　　校正因子測定 取萘對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lml含25μg的溶液，作為內標溶液。取石斛堿對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，作為對照品溶液。精密量取對照品溶液2ml，置5ml量瓶中，精密加入內標溶液1ml，加甲醇至刻度，搖勻，吸取1μl，注入氣相色譜儀，計算校正因子。
　　測定法 取本品（鮮品干燥后粉碎）粉末（過三號篩）約0.25g，精密稱定，置圓底燒瓶中，精密加入0.05%甲酸的甲醇溶液25ml，稱定重量，加熱回流3小時，放冷，再稱定重量，用0.05%甲酸的甲醇溶液補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續濾液2ml，置5ml量瓶中，精密加入內標溶液1ml，加甲醇至刻度，搖勻，吸取1μl，注入氣相色譜儀，測定，即得。
　　本品按干燥品計算，含石斛堿（C16H25NO2）不得少于0.40%。
　　霍山石斛 照紫外-可見分光光度法（通則0401）測定。
　　對照品溶液的制備 取D-無水葡萄糖對照品適量，精密稱定，加水制成每1ml含100μg的溶液，即得。
　　標準曲線的制備 精密量取對照品溶液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml，分別置10ml具塞試管中，各加水至1.0ml，精密加入5%苯酚溶液1ml（臨用配制），搖勻，再精密加硫酸5ml，搖勻，置沸水浴中加熱20分鐘，取出，置冰浴中冷卻5分鐘，以相應試劑為空白，照紫外-可見分光光度法（通則0401），在488nm的波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。
　　測定法 取本品（鮮品干燥后粉碎）粉末（過三號篩）約0.4g，精密稱定，加水200ml，加熱回流2小時，放冷，轉移至250ml量瓶中，用少量水分次洗滌容器，洗液并入同一量瓶中，加水至刻度，搖勻，濾過。精密量取續濾液2ml，置15ml離心管中，精密加入無水乙醇10ml，搖勻，冷藏1小時，取出，離心（轉速為每分鐘4000轉）20分鐘，棄去上清液，沉淀加80%乙醇洗滌2次，每次8ml，離心，棄去上清液，沉淀加熱水溶解，轉移至25ml量瓶中，放至室溫，加水至刻度，搖勻。精密量取供試品溶液1ml，置10ml具塞試管中，照標準曲線制備項下的方法，自“精密加入5%苯酚溶液1ml”起依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中D-無水葡萄糖的量，計算，即得。
　　本品按干燥品計算，含多糖以無水葡萄糖（C6H12O6）計，不得少于17.0%。
　　鼓槌石斛 照高效液相色譜法（通則0512）測定。
　　色譜條件與系統適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.05%磷酸溶液（37:63）為流動相；檢測波長為230nm。理論板數按毛蘭素峰計算應不低于6000。
　　對照品溶液的制備 取毛蘭素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含15μg的溶液，即得。
　　供試品溶液的制備 取本品（鮮品干燥后粉碎）粉末（過三號篩）約lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，浸漬20分鐘，超聲處理（功率250W，頻率40kHz）45分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。
　　測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
　　本品按干燥品計算，含毛蘭素（C18H22O5）不得少于0.030%。
　　飲片
　　【炮制】干石斛 除去殘根，洗凈，切段，干燥。霍山石斛除去雜質。
　　【性狀】本品呈扁圓柱形或圓柱形的段。表面金黃色、綠黃色或棕黃色，有光澤，有深縱溝或縱棱，有的可見棕褐色的節。切面黃白色至黃褐色，有多數散在的筋脈點。氣微，味淡或微苦，嚼之有黏性。
　　鮮石斛 鮮品洗凈，切段。
　　【性狀】呈圓柱形或扁圓柱形的段。直徑0.4～1.2cm。表面黃綠色，光滑或有縱紋，肉質多汁。氣微，味微苦而回甜，嚼之有黏性。
　　【鑒別】（除橫切面外）【檢查】同藥材。
　　霍山石斛【性狀】【鑒別】【檢查】【特征圖譜】【浸出物】【含量測定】同藥材。
　　【性味與歸經】甘，微寒。歸胃、腎經。
　　【功能與主治】益胃生津，滋陰清熱。用于熱病津傷，口干煩渴，胃陰不足，食少干嘔，病后虛熱不退，陰虛火旺，骨蒸勞熱，目暗不明，筋骨痿軟。
　　【用法與用量】6～12g；鮮品15～30g。
　　【貯藏】干品置通風干燥處，防潮；鮮品置陰涼潮濕處，防凍。