產品描述
烏梢蛇WushaosheZAOCYS 本品為游蛇科動物烏梢蛇Zaocys dhumnades(Cantor)的干燥體。多于夏、秋二季捕捉,剖開腹部或先剝皮留頭尾,除去內臟,盤成圓盤狀,干燥。
【性狀】本品呈圓盤狀,盤徑約16cm。表面黑褐色或綠黑色,密被菱形鱗片;背鱗行數成雙,背中央2~4行鱗片強烈起棱,形成兩條縱貫全體的黑線。頭盤在中間,扁圓形,眼大而下凹陷,有光澤。上唇鱗8枚,第4、5枚入眶,頰鱗1枚,眼前下鱗1枚,較小,眼后鱗2枚。脊部高聳成屋脊狀。腹部剖開邊緣向內卷曲,脊肌肉厚,黃白色或淡棕色,可見排列整齊的肋骨。尾部漸細而長,尾下鱗雙行。剝皮者僅留頭尾之皮鱗,中段較光滑。氣腥,味淡。
【鑒別】本品粉末黃色或淡棕色。角質鱗片近無色或淡黃色,表面具縱向條紋。表皮表面觀密布棕色或棕黑色色素顆粒,常連成網狀、分枝狀或聚集成團。橫紋肌纖維淡黃色或近無色。有明暗相間的細密橫紋。骨碎片近無色或淡灰色,呈不規則碎塊,骨陷窩長梭形,大多同方向排列,骨小管密而較粗。
【浸出物】照醇溶性浸出物測定法(通則2201)項下的熱浸法測定,用稀乙醇作溶劑,不得少于12.0%。
飲片
【炮制】烏梢蛇 去頭及鱗片,切寸段。
【性狀】本品呈半圓筒狀或圓槽狀的段,長2~4cm,背部黑褐色或灰黑色,腹部黃白色或淺棕色,脊部隆起呈屋脊狀,脊部兩側各有2~3條黑線,肋骨排列整齊,肉淡黃色或淺棕色。有的可見尾部。質堅硬,氣腥,味淡。
【鑒別】聚合酶鏈式反應法。
模板DNA提取 取本品0.5g,置乳缽中,加液氮適量,充分研磨使成粉末,取0.1g置1.5ml離心管中,加入消化液275μl[細胞核裂解液200μl,0.5mol/L乙二胺四醋酸二鈉溶液50μl,蛋白酶K(20mg/ml)20μl,RNA酶溶液5μl],在55℃水浴保溫1小時,加入裂解緩沖液250μl,混勻,加到DNA純化柱中,離心(轉速為每分鐘10000轉)3分鐘;棄去過濾液,加入洗脫液800μl[5mol/L醋酸鉀溶液26μl,1mol/L Tris-鹽酸溶液(pH值7.5)18μl,0.5mol/L乙二胺四醋酸二鈉溶液(pH值8.0)3μl,無水乙醇480μl,滅菌雙蒸水273μl],離心(轉速為每分鐘10000轉)1分鐘;棄去過濾液,用上述洗脫液反復洗脫3次,每次離心(轉速為每分鐘10000轉)1分鐘;棄去過濾液,再離心2分鐘,將DNA純化柱轉移入另一離心管中,加入無菌雙蒸水100μl,室溫放置2分鐘后,離心(轉速為每分鐘10000轉)2分鐘,取上清液,作為供試品溶液,置零下20℃保存備用。另取烏梢蛇對照藥材0.5g,同法制成對照藥材模板DNA溶液。
PCR反應 鑒別引物:5'GCGAAAGCTCGACCTAG-CAAGGGGACCACA3'和5'CAGGCTCCTCTAGGTTGTTA-TGGGGTACCG3'。PCR反應體系:在200μl離心管中進行,反應總體積為25μl,反應體系包括10×PCR緩沖液2.5μl,dNTP(2.5mmol/L)2μl,鑒別引物(10μmol/L)各0.5μl,高保真Taq DNA聚合酶(5U/μl)0.2μl,模板0.5μl,無菌雙蒸水18.8μl。將離心管置PCR儀,PCR反應參數:95℃預變性5分鐘,循環反應30次(95℃ 30秒,63℃ 45秒),延伸(72℃)5分鐘。
電泳檢測 照瓊脂糖凝膠電泳法(通則0541),膠濃度為1%,膠中加入核酸凝膠染色劑GelRed;供試品與對照藥材PCR反應溶液的上樣量分別為8μl,DNA分子量標記上樣量為2μl(0.5μg/μl)。電泳結束后,取凝膠片在凝膠成像儀上或紫外透射儀上檢視。供試品凝膠電泳圖譜中,在與對照藥材凝膠電泳圖譜相應的位置上,在300~400bp應有單一DNA條帶。
【檢查】水分 不得過13.0%(通則0832第二法)。
【浸出物】同藥材。
烏梢蛇肉 去頭及鱗片后,用黃酒悶透,除去皮骨,干燥。
每100kg烏梢蛇,用黃酒20kg。
【性狀】本品為不規則的片或段,長2~4cm,淡黃色至黃褐色。質脆。氣腥,略有酒氣。
【鑒別】同烏梢蛇(飲片)。
【檢查】水分 不得過11.0%(通則0832第二法)。
【浸出物】同藥材,不得少于14.0%。
酒烏梢蛇 取凈烏梢蛇段,照酒炙法(通則0213)炒干。
每100kg烏梢蛇,用黃酒20kg。
【性狀】本品形如烏梢蛇段。表面棕褐色至黑色,蛇肉淺棕黃色至黃褐色,質堅硬。略有酒氣。
【鑒別】同烏梢蛇(飲片)。
【檢查】水分 不得過13.0%(通則0832第二法)。
【浸出物】同藥材。
【性味與歸經】甘,平。歸肝經。
【功能與主治】祛風,通絡,止痙。用于風濕頑痹,麻木拘攣,中風口眼?斜,半身不遂,抽搐痙攣,破傷風,麻風,疥癬。
【用法與用量】6~12g。
【貯藏】置干燥處,防霉,防蛀。